التحقق من صحة طريقة تحليلية مُحسّنة باستخدام HPLC-FLD للتقدير المتزامن للغليفوزات وAMPA وتطبيقها على عينات مياه بيئية

الملخص

تهدف هذه الدراسة إلى التحقق من صحة طريقة تحليلية محسّنة للتقدير المتزامن عالي الحساسية للغليفوزات وناتج تحلله الرئيس AMPA باستخدام HPLC-FLD بعد الاشتقاق (قبل العمود) بكاشف FMOC-Cl، مع تطبيقها على عينات مائية بيئية. تم تحديد الشروط المثلى للاشتقاق عند pH = 10.5 وزمن تفاعل min 45 وتركيز FMOC-Cl مقداره µM 8، مع فصل كروماتوغرافي باستخدام طور متحرك من الأسيتونتريل ومحلول منظم من خلات الصوديوم (mM 20، pH = 5.2) بنسبة (50:50، v/v)، والكشف عند أطوال موجية للإثارة والانبعاث nm 310/265. أظهرت النتائج وفق إرشادات ICH Q2(R1) انتقائية عالية وخطية ممتازة (r² = 0.999) ضمن المجال ppb (0.88 – 56.36) للغليفوزات وppb (0.58 – 37.01) لـ AMPA. تراوحت نسب الاسترجاع بين
 %(92.38 – 103.92) و %(87.19 – 105.24)، مع دقة جيدة تمثلت بقيم %RSD أقل من %2 للتكرارية وأقل من %5 للدقة المتوسطة. بلغت حدود الكشف ppt (3.9 و1.7)، وحدود التقدير الكمي ppt (12 و5) للغليفوزات وAMPA على الترتيب. عند تطبيق الطريقة على عينات مياه بيئية، تم الكشف عن المركبين في مياه سطحية زراعية بتراكيز ppb 38.15 للغليفوزات و ppb26.60 ﻠAMPA ، مما يؤكد كفاءة الطريقة وحساسيتها العالية للرصد البيئي عند التراكيز المنخفضة، ويجعلها أداة موثوقة للدراسات الرقابية.